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TUNEL 細胞凋亡檢測試劑盒是采用非同位素方法來檢測細胞在凋亡過程中DNA 的斷裂情況,可在原位快速準確地檢測單個凋亡細胞。本試劑盒適用于組織樣本(石蠟包埋、冰凍和超薄切片)和細胞樣本(細胞涂片)的凋亡原位檢測。
其原理是細胞凋亡發生時,內源性核酸酶激活,使DNA的雙鏈斷裂或一條鏈出現缺口,產生一系列3’-OH末端,在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)作用下,組織細胞原位DNA切口可被標記上生物素-dUTP,即TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTP Nick End Labeling),可與連接了的辣根過氧化酶的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)特異結合,在辣根過氧化酶底物二氨基聯苯胺(DAB)的存在下,顯示為棕色(過氧化物酶活性),特異準確地定位正在凋亡的細胞,在普通顯微鏡下即可觀察和計數凋亡細胞;由于正的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA 的斷裂,因而沒有3'-OH 形成,很少能夠被染色。
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