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一、服務簡介動物:大鼠,SPF級,健康,雄性造模方法:1,經(jīng)腹腔注射麻醉大鼠;剃除頭頂部毛發(fā)后固定于腦立體定位以上,手術區(qū)皮膚消毒,切開皮膚,暴露顱骨。2,參照大鼠腦立體定位圖譜(國內多選用包新民的大鼠腦立體定向圖譜),在前后囟2mm、中線外1mm處,用牙科鉆鑿開顱骨,切開硬腦殼膜,用刀置于上述部位的腦表面,降刀4.5mm,外移1mm,再降刀1mm,外移1.5mm,上下抽動刀20次,以*切斷穹隆海馬傘。可行單側,也可行雙側穹隆海馬傘切除。術后連續(xù)應用頭孢唑啉鈉(50mg/kg...
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1.將水迷宮加入適當?shù)乃疁乜刂圃?5±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環(huán)境。3.設置軟件。4.一階段:(定位航行)將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進行實驗(所有小鼠需全部做完后換下一象限)。若動物在60s內登上平臺區(qū)域,則結束。若動物在60s內未登上平臺區(qū)域,則用木棍指引大鼠游上平臺,并停留30s。每只小鼠每天訓練4次,訓練天數(shù)為4天。5.每只動物實驗結束后需用干毛巾擦拭,必要時需要使用電吹風吹干。6.二階段(空間探索):待一象限到第四象限全部做...
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ELASA:用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各...
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一、服務介紹免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗體與抗原間的特異性結合特性,將抗原(我們感興趣的靶蛋白)-抗體復合物從樣品中分離出來,達到初步分離純化靶蛋白的目的。之后,樣品可以再進行Westernblot分析。二、實驗原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應達到純化,定性檢測蛋白的目的,即在蛋白質提取液中加入與抗原(靶蛋白質)特異性結合的抗體,抗體與抗原結合后形成免疫復合物,再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育,通過離心得到免疫復合...
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目的無菌大鼠的培育中,出生后飼喂的人工配制乳對于無菌大鼠的培養(yǎng)至關重要。深度水解蛋白的無乳糖奶粉,便于嬰幼兒吸收,減少了各種消化不良和過敏反應,那么在無菌大鼠使用的奶中加入這種奶粉是否會對無菌大鼠的培育有積極的作用,并且檢測飼養(yǎng)成功的無菌大鼠的生化指標。方法使用清潔級的SD大鼠,確定臨產(chǎn)期,摘除*宮后,在隔離器內剝離大鼠幼崽,使用人工方法哺乳至22d離乳,記錄體重和生存率。使用的配方奶中,加入深度水解蛋白無乳糖奶粉的為實驗組,對照組中加入全價配方奶粉。對培育成功的無菌大鼠在第...
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目的觀察皮下注射不同天數(shù)異丙腎上腺素(1mg/kg體質量)誘發(fā)大鼠特異性心肌病所引起心肌組織切片HE染色、VEGF(血管內皮生長因子)、FCF(成纖維細胞生長因子)表達及心電圖T波的變化。方法除空白組外各組大鼠皮下多點注射異丙腎上腺素(1mg/kg),分別為連續(xù)皮下多點注射異丙腎上腺素(1mg/kg)2d組、連續(xù)皮下多點注射異丙腎上腺素(1mg/kg)4d組、連續(xù)皮下多點注射異丙腎上腺素(1mg/kg)6d組。給藥1周后,大鼠麻醉,測心電圖,取心臟,采用HE染色觀察大鼠心肌細...
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目的建立SpragueDawley(SD)大鼠的正常膝關節(jié)滑膜細胞原代培養(yǎng)方法及脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)誘導成纖維樣滑膜細胞(fibroblast-likesynoviocytes,FLS)炎癥模型。方法選取80~120gSPF級幼年SD大鼠,分離其滑膜組織,原代培養(yǎng)至第3代,用組織化學染色法和EdU法檢測FLS蛋白標志物vimentin和增殖功能。同時,用滑膜組織作對照,檢測第3代至第8代原代培養(yǎng)FLS的特征蛋白表達,篩選具有生理功能的高純度...
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