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簡要描述:細胞藥物毒性試驗是達為科生物的基礎服務項目之一,由細胞平臺經(jīng)驗豐富的實驗人員操作完成。
詳細介紹
MTT常應用于檢測細胞的增殖能力,其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan),并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶標儀在490nm波長處測定其吸光度值(OD值),在一定細胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結晶形成的量與細胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值)來判斷活細胞數(shù)量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。
CCK-8常應用于檢測細胞的增殖能力。CCK-8試劑中含有WST–8:化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪*(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比,用酶標儀在450nm波長處測定其吸光度值(OD值)來判斷活細胞數(shù)量,OD值越大,細胞活性越強(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。
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