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動物類型:昆明小鼠
造模試劑(1):Aβ25-35
造模方法:小鼠經腹腔注射麻醉,固定于腦立體定位儀,暴露前鹵,參照腦立體定位圖譜,每只小鼠右側腦室注射3μl Aβ25-35(2μg/μl)。坐標為前鹵后1.2mm,矢狀縫右側旁開1.2mm,即為側腦室的體表部位,進針深度為顱骨表面向下3.2mm;注射時進針1μl/min,注射后留針8min,拔針時速度為1mm/min。
造模試劑(2):AlCl3
造模方法:小鼠右側腦室內注射3μl AlCl3(2.5%),注射坐標方法同上。
造模試劑(3):海馬物理損傷
造模方法:小鼠固定于腦立體定位儀,坐標為前鹵后2.4mm,矢狀縫右旁開2.0mm,使用自制首端彎曲的9號針頭垂直插入兩側海馬,順時針轉一周,進針深度為顱骨表面向下3mm。
直接購買AD轉基因小鼠(4)
轉基因模型可分為:APP轉基因模型,PS-1轉基因模型,ApoE4轉基因模型,tau蛋白轉基因模型,雙重和三重轉基因模型
造模方法:各轉基因動物AD模型制作方法和原理基本相同,以APP轉基因動物模型為例:
從人類cDNA文庫可獲取h-APP基因cDNA可表達片段,在5’端連接合適的啟動子,3’端連接SV40及其PolyA尾既構成外源h-APP基因。H-APP基因經體外擴增,裂解純化去除質粒序列后,通過一定的方法直接注入小鼠受精卵或早期胚胎細胞核內使之穩定地整合于染色體內,將該受精卵或胚胎細胞植入假孕母*宮或輸卵管內發育成熟,即可獲得穩定表達外源h-APP基因的基因鼠。
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