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免疫熒光標記技術(shù)(immunofluorescencetechnique)是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當(dāng)與其相對應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時,在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗原抗體結(jié)合部位,檢測出抗原或抗體。實驗材料懸浮細胞試劑、試劑盒多聚-L-賴氨酸儀器、耗材離心機培養(yǎng)箱實驗步驟1.細胞在冰浴中冷卻,然后用臺式離心機于4℃以800g離心5min,吸去培養(yǎng)液并以4℃PBS重懸細胞。2.離心吸去PBS,以1~2ml2%PFA固定液,...
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進行實驗動物灌流是獲得良好的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果以及保存腦、腎、心臟和其他許多器官所必需的。對于未經(jīng)訓(xùn)練的實驗人員,初次進行灌流可能會失敗,故建議首先用一些對照實驗動物練習(xí),以熟悉此過程。基本方案實驗材料小鼠試劑、試劑盒PBS儀器、耗材23-G針頭注射管解剖器械實驗步驟1.一支針管吸滿1×PBS,另一支吸4%PFA固定液(4℃),擱置待用。2.在袋中用CO2氣體處死小鼠。停止吸呼后,立刻背朝下放平小鼠,小心剖開胸腔防止過多出血,小心并迅速切開肋骨,剪去橫隔膜,暴露心臟。3.小心將吸...
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名稱:實驗動物的取血關(guān)鍵詞:動物,取血,方法目的:規(guī)范實驗動物(家兔、狗,豚鼠)取血的方法和途徑,主體內(nèi)容:(一)家兔1.耳緣靜脈取血法選好耳緣靜脈,拔去被毛,用二甲苯或酒精涂擦局部,小血管夾夾緊耳根部,使血管充血擴張。術(shù)者持粗針頭從耳尖部血管,逆回流方向刺入靜脈內(nèi)取血,或用刀片切開靜脈,血液自動流出,取血后棉球壓迫止血,取血量2~3ml。壓住側(cè)支靜脈,血液更容易流出;取血前耳緣部涂擦液體石蠟,可防止血液凝固。2.耳中央動脈取血法家兔固定箱內(nèi),用手揉擦耳部,使中央動脈擴張。左...
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實驗方法原理藥物半數(shù)致死量LD50是指藥物急性毒性實驗中,當(dāng)動物死亡率為50%時的單次給藥劑量,單位通常為mg/kg。例如,當(dāng)某藥物給予400mg劑量時,可致使一半家兔(體重約為4kg)死亡,則其LD50值為100mg/kg。LD50值通常反映藥物急性毒性的大小。藥物的急性毒性、慢性毒性實驗同屬于一般毒理學(xué)的研究范疇。此外,藥物毒理學(xué)研究尚包括特殊毒理學(xué)(致癌、致畸、致突變)、藥物依賴性及過敏反應(yīng)實驗等。各種屬動物均可用于藥物L(fēng)D50值的測定,通常使用嚙齒類動物(大鼠和小鼠)...
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【實驗?zāi)康摹?.學(xué)習(xí)大鼠胃潰瘍(gastriculcer)模型建立的方法。2.觀察藥物對實驗性胃潰瘍的防治作用。3.了解組織切片和HE染色方法。【實驗原理】消化性潰瘍(pepticulcer)是由多種因素引起的一種常見病。正常情況下,機體有胃黏液、胃黏膜屏障(mucosalbarrier)、黏膜細胞更新以及胃、十二指腸節(jié)律性運動功能等一系列保護性機理,使胃、腸黏膜不受損傷。但過度的精神緊張、情緒激動,會使神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌功能紊亂;飲食失調(diào),如粗糙食物,骨刺等對黏膜的物理性損害...
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實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒RNA提取試劑盒熒光定量PCRMixTRIZOLdNTP氯仿逆轉(zhuǎn)錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚蘭儀器、耗材離心管離心機風(fēng)光光度計電泳槽凝膠板RealtimePCR儀一、樣品RNA的抽提1.取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。2.兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃...
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ELISA實驗因靈敏度高,特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可,但對初學(xué)者而言,如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié),可能會對最終的實驗結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響,比如實驗出現(xiàn)白板,顯色弱靈敏度低,花板無梯度背景高等現(xiàn)象。下面對以上實驗現(xiàn)象進行一一解析。1.白板現(xiàn)象在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現(xiàn)。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:試劑已過保質(zhì)期,不同批次稀釋液交叉使用。錯加漏加檢測A,檢測B或者底物溶液TMB。洗板或者加樣過程中,酶標記物被污...
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