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人非小細胞肺癌裸鼠原位種植轉移模型的建立：（1）探討肺癌遠處轉移和阻斷其遠處轉移的研究；（2）模擬晚期非小細胞肺癌轉移的自然發生過程；（3）在活體動物的完整器官內評估瘤細胞播散和腫瘤的生長。實驗方法原理將表達GFP的質粒pRNAT-U6/Neo轉染人肺腺癌細胞A549，G418篩選獲得穩定表達GFP細胞，對比轉染前后細胞的生長活性和成瘤性。將轉染后細胞原位種植裸鼠預定標準處死。HE染色和免疫組化檢測轉移灶的位置和數目。利用KODAKIS2000MM系統檢測腫瘤播散情況。實驗材...

人胃癌高轉移模型的建立可以：（1）研究腫瘤轉移機制；（2）研究腫瘤防治；（3）為腫瘤轉移研究提供更為理想的動物模型。腫瘤組織塊原位移植法實驗方法原理用人胃癌組織塊SGC-7901原位移植于SCID小鼠，第4周末移植瘤向淋巴結和肝臟等器官轉移，轉移率達66.7%(2/3)，第6周末轉移率高達*(10/10)。實驗材料雄性SPF級SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901試劑、試劑盒水合氯醛福爾馬林液儀器、耗材飼養籠光學顯微鏡石蠟實驗步驟一、實驗材料準備1.雄性SPF級SCID小鼠，...

人胰腺癌裸小鼠模型實驗方法原理將人胰腺癌細胞株8988接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測量腫瘤大小，第42d處死小鼠。腫瘤組織及相關臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測相關抗原。皮下腫瘤組織細胞及細胞株培養，HE染色。實驗材料裸小鼠BALBcnu-nu胰腺癌細胞株8988試劑、試劑盒RPMI-1640*培養基胰酶戊二醛儀器、耗材CO2培養箱試管實驗步驟一、實驗材料準備裸小鼠BALB/cnu-nu，4～6周齡，體重16～20g，雌雄兼備，SPF級環境中飼養，恒溫25～27℃，恒濕45...

試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環儀實驗步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用；作者發現Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數需要.如果需要提高PCR產物的特異性，應該使用熱啟動聚合酶。使用Tag聚合酶本身附帶的緩沖液。2.核酸和寡核苷酸（1）溶于水的DNA如果DNA在TE中，應該在PCR反應混合物中添加MgCl2.如果用從石蠟包埋的組織中純化的DNA做模板，選擇的STR標記的大小應該是78~250bp,因為這些DNA模板...

免疫熒光方法中的重要環節:1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細胞內部結構破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴重。2、組織切片固定：切好片風干后立即用冰丙酮等固定液進行固定5-10min，尤其要較長時間保存的白片，一定要及時固定和適當保存。3、血清封閉：為防止內源性非特異性蛋白抗原的結合，需要在一抗孵育前先用血清（與二抗來源一致）封閉，減弱背景著色。血清封閉的時間是可以調整的，一般10-30min。4、一抗孵育條件：在免疫組化反...

免疫熒光標記技術（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素，當與其相對應的抗原或抗體起反應時，在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位，檢測出抗原或抗體。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒PBS抗體儀器、耗材玻片加濕盒實驗步驟1.將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。2.待載玻片達室濕且未干...

一.細胞復蘇與培養將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養基質混勻細胞沉淀，再1500轉/分，離心3分鐘，棄上清，細胞沉淀用1.0ml培養基混勻，備用。另取一個75cm2方瓶，加入14.0ml培養基質，將上述制備的含腫瘤細胞懸液(1.0ml)加入此方瓶中，于37℃，5%CO2孵育箱中培養。若此腫瘤細胞懸浮生長，大約3－4天細胞基質會變黃，5.0ml細胞懸液可傳代...