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癲癇模型建模方法
1)腹腔注射氯化鋰(127mg/kg),用以易化匹羅卡品的致癇作用;
2)18.5~23.5h后腹腔注射溴化甲基東莨菪堿(1mg/kg),用以減輕致癇劑匹羅卡品的外周膽堿能副反應;
3)30min后腹腔注射匹羅卡品(60mg/kg);
4)注射匹羅卡品后對大鼠的行為學表現進行觀察,并根據Racine標準對每只大鼠的發作程度進行評定,癲癇持續狀態(SE)規定為連續的全身性發作(4或5級發作,4級主要表現為直立,5級主要表現為直立并摔倒,均同時伴有全身陣攣性發作)或多個4或5級發作,并且行為學在90min發作間期內未恢復正常者。記錄發作的時間潛伏期(從給藥到SE開始的時間)。如給藥30min后無SE發作,重復給藥一次。
5)SE 90min后,腹腔注射(4mg/kg)終止發作,以避免癇性發作致死。發作程度<4級的大鼠剔除。飼養1周后觀察,無自發性癲癇發作的大鼠剔除。給予抗癲癇藥物苯妥英鈉(PHT)75mg/kg腹腔注射一次,觀察一周,仍出現癲癇發作的大鼠給予PHT 75 mg/kg腹腔注射一次,觀察一周,仍出現癲癇發作的為成功模型。
耐藥相關指標研究 海馬組織,突觸前SV2A蛋白、突觸后PSD-95蛋白、GluR2、miR-485
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