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脊髓損傷模型建模方法
腹腔注射進行麻醉,四肢固定與手術臺上,松緊適中,手術過程中注意觀察四肢是否出現瘀血,注意揉搓。此時,可用大頭針刺激小鼠尾巴,如果小鼠的反應不強烈,預示著可以開始手術。首先剪除小鼠胸椎區域毛,而后將備皮區域消毒。在小鼠背部脊柱有一個明顯的凸起(T11),從該凸起區域剖開皮膚2-3cm,逐步暴露筋膜、肌肉直到椎骨。在T9~T11水平緊貼棘突兩側將椎旁肌縱行鈍性分離.咬除T9~T11棘突,顯露并切除椎板,暴露脊髓。將脊髓在T10椎體水平由克氏針進行擊打損傷(具體步驟待查),可見小鼠后肢抽搐數次后癱瘓。術后立即用消毒的手術縫合針線分別對肌肉、筋膜和皮膚進行縫合,每縫合完一層時用酒精對其消毒,縫合完皮膚后在縫合區域消毒。對小鼠注射1ml(8U/ml)青霉素、5ml葡萄糖氯化鈉溶液。而后將小鼠平放于干燥的鼠籠重疊于裝有45-50℃的溫水中,保溫7小時。小鼠急性脊髓損傷后,T9以下的神經對各個臟器及肌肉組織失去了制備,一般以癱瘓(后肢運動功能障礙)、尿潴留、大便異常和自噬癥為主。因此需要對小鼠進行細心護理,注意對傷口的處理。每天早晚兩次對小鼠膀胱、后肢揉搓,幫助排尿,還需要用藥,每天注射1ml(8U/ml)青霉素,連續3天。飼料和飲用水正常供應。
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